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高靈敏度快速檢測(cè)紅細(xì)胞中亞鐵血紅素含量的方法
點(diǎn)擊次數(shù):5317 更新時(shí)間:2016-11-03

高靈敏度快速檢測(cè)紅細(xì)胞中亞鐵血紅素含量的方法

 

在實(shí)驗(yàn)室條件下快速準(zhǔn)確的檢測(cè)出亞鐵血紅素的含量是十分重要的,其重要程度正如胞內(nèi)血紅蛋白在新陳代謝中所扮演的重要角色。Jason R. Marcero 等研究者將傳統(tǒng)的檢測(cè)方法(吡啶血色原檢測(cè)法,熒光亞鐵血紅素檢測(cè)法)與采用CLARiTY分光光度計(jì)實(shí)施的以光譜技術(shù)為基礎(chǔ)的檢測(cè)方法相比較。用以上三種檢測(cè)方法檢測(cè)血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液,老鼠全血,小鼠紅白血病細(xì)胞(MEL)以及小鼠K562細(xì)胞,檢測(cè)結(jié)果顯示所有樣本均富含與血紅蛋白相結(jié)合的亞鐵血紅素。然而在亞鐵血紅素的檢測(cè)過(guò)程中,吡啶血色原檢測(cè)方法顯示出zui大的線性范圍,三種檢測(cè)方法的靈敏度和檢測(cè)量(~1uM)均相似。熒光檢測(cè)法在微量樣品的檢測(cè)方面表現(xiàn)出其*性。將CLARiTY系統(tǒng)與吡啶血色原以及細(xì)胞計(jì)數(shù)相結(jié)合,使得0.46 uM-1 cm-1血液、MEL細(xì)胞、K562細(xì)胞中的血紅蛋白的消光系數(shù)能夠被測(cè)定。這一測(cè)量數(shù)值可用于測(cè)定EML細(xì)胞血紅蛋白隨誘導(dǎo)素的添加量的變化情況,從而反映出誘導(dǎo)素對(duì)亞鐵血紅素生物合成的影響。

 

原文:

Jason R. Marcero, Robert B. Piel III, Joseph S. Burch, and Harry A. Dailey. Rapid and sensitive quantitation of heme in hemoglobinized cells. BioTechniques 61:83-91 (August 2016).

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